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摘要：目的利用疊氮溴化丙錠(PMA)結合實時熒光定量PCR(qPCR)技術,建立應用于口岸消毒效果的快速評價方法。方法針對細菌16S rRNA基因建立qPCR反應體系,以銅綠假單胞菌為對象,采用菌片浸泡定量殺菌試驗對口岸常用含氯消毒劑(泰勝)進行消毒效果評價,分別比較培養計數法、qPCR和PMA-qPCR法評價消毒效果的有效性。結果基于16S rRNA基因的q PCR法重復性好,靈敏度高,細菌最低檢測濃度為63 cfu/ml;PMA處理對活菌無顯著影響。對比3種檢測方法發現,未經PMA處理的q PCR法檢測消毒前后細菌數量變化較小,而PMA-qPCR法檢測結果顯示消毒后細菌數量顯著下降(下降3.52個log值),且PMA-qPCR法的檢測結果與傳統培養法相近,說明PMAq PCR法能有效抑制死亡細菌的擴增,真實反映消毒后的細菌存活情況。結論建立的PMA-qPCR法進行口岸消毒效果評價具有快速、靈敏度高等優點,有望發展為口岸適用的快速評價消毒效果的有利工具。