亚洲国产精品无码成人片久久-夜夜高潮夜夜爽夜夜爱爱-午夜精品久久久久久久无码-凹凸在线无码免费视频

摘要：目的探討miR-149-5p靶向CDK6對口腔鱗狀細胞癌(OSCC)細胞生長、侵襲和遷移的影響。方法利用Lipofectamine 2000將miR-149-5p mimic質粒、mimic-NC質粒、CDK6質粒分別或聯合轉染進入Tca8113細胞,運用基因預測軟件預測miR-149-5p的靶基因,采用雙熒光素酶實驗驗證靶向關系,RT-PCR檢測miR-149-5p與CDK6 mRNA的表達,MTT法檢測細胞活性,克隆形成實驗檢測細胞生長情況,流式細胞術檢測細胞周期分布和細胞凋亡情況,Transwell法檢測細胞侵襲能力,劃痕實驗檢測細胞遷移能力,Western blot檢測CDK6、C-Myc、和Cyclin D1的表達,裸鼠右后肢腹側皮下注射構建OSCC移植瘤模型,并測定移植瘤體積和重量,同時采用免疫組化檢測Ki67和Vimentin的表達。結果miR-149-5p在OSCC細胞中低表達,與CDK6在3′UTR區存在結合位點,miR-149-5p直接靶向抑制CDK6;miR-149-5p過表達能夠明顯降低Tca8113細胞活性和克隆數目,并增強G0/G1期細胞周期阻滯,增加凋亡率,減少侵襲數目,降低傷口愈合率,且下調C-Myc、CDK6、Cyclin D1蛋白表達,而加入CDK6后能夠反轉這些現象;miR-149-5p過表達會使體內移植瘤的重量和體積明顯減少,并使移植瘤的Ki67和Vimentin的陽性細胞比率明顯減少。結論miR-149-5p靶向CDK6對口腔鱗狀細胞癌細胞生長、侵襲和遷移具有抑制作用。