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摘要：目的克隆表達人腺病六鄰體高變區片段,了解其結構和功能,為研發腺病毒基因工程重組疫苗奠定基礎。方法根據生物信息學軟件預測的腺病毒六鄰體的高變區域,選擇目標基因,設計其對應的引物,并以團隊保存的人腺病毒六鄰體核酸序列為模板,聚合酶鏈反應擴增目標基因,定向插入載體pQE32中構建工程質粒。通過酶切和基因測序鑒定陽性工程質粒,并誘導其在大腸桿菌M15中高效表達帶有組氨酸標記的靶蛋白,應用鎳樹脂親和層析的方法分離純化靶蛋白。結果構建了含有人腺病毒六鄰體高變區片段的重組質粒,同時探索出其在大腸桿菌M15中高效表達的條件,純化目標蛋白,其分子量約為188000,與應用生物信息學分析預測的結果相同。結論成功地克隆、表達和純化了人腺病毒六鄰體高變區片段。