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摘要：【目的】朱砂葉螨是世界范圍廣泛分布的重要經(jīng)濟(jì)害螨,害螨防治十分困難.而幾丁質(zhì)酶是昆蟲(chóng)體內(nèi)幾丁質(zhì)代謝中分解幾丁質(zhì)的關(guān)鍵酶,在更替新舊表皮和降解圍食膜中起著重要的作用,幾丁質(zhì)酶是潛在的螨害生物防治靶標(biāo).本研究對(duì)朱砂葉螨幾丁質(zhì)酶TecCht1進(jìn)行原核表達(dá)和純化.【方法】克隆朱砂葉螨TecCht1基因的催化結(jié)構(gòu)域,連接到pColdⅡ載體上,構(gòu)建pColdⅡ/TecCht1重組表達(dá)載體,在大腸桿菌中進(jìn)行高效表達(dá),采用鎳柱純化目的蛋白,并進(jìn)行Western Blot檢測(cè).【結(jié)果】TecCht1在pColdⅡ載體上成功高水平表達(dá),確定最佳誘導(dǎo)表達(dá)時(shí)間為24h.對(duì)TecCht1進(jìn)行大量表達(dá)和純化,經(jīng)Western Blot驗(yàn)證,獲得純度較高的目的蛋白.【結(jié)論】實(shí)現(xiàn)TecCht1體外高效原核表達(dá),獲得大量的TecCht1重組蛋白.